上海遠慕生物科技有限公司

    上海遠慕為您提供人p物質（SP）ELISA分析檢測試劑盒，我司是家專業供應進口/國產ELISA試劑盒的優質供應商，專業出售酶聯免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，染色試劑盒，生化試劑盒以及培養基，抗體，動物血清，標準品，化學試劑，實驗耗材，細胞株，其他實驗試劑及實驗品，ELISA種屬涵蓋了科研實驗所需的動植物，咨詢！

    中文名：人p物質（SP）ELISA試劑盒

    別名：人p物質（SP）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    產品規格：96T/48T

    檢測限：7.81-500 pg/mL

    經營種類：進口分裝和原裝、國產。

    預期應用：定性或者定量檢測人血清、血漿、尿液、組織液中的人P物質（SP）

    檢測種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬

    適用范圍：僅供科研使用，不得用于臨床

    標本收集 注意事項：

    1）在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。

    2）我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。標本類型：標本必須為液體，不含沉淀，包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本，請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復凍融。

    操作步驟：

    1、加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

    2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

    3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此

    重復5次，拍干。

    5、加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

    6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

    10 分鐘。

    7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

    8、測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

    Elisa試劑盒對標本的要求：

    1、血清：：溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    2、血漿：根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    3、尿液：無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    4、 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

    5、組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑，用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

    人p物質（SP）ELISA試劑盒操作常見問題解析：

    1.加樣

    在現在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關鍵點是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區，易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現氣泡則反應液界面有差異。所以，有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。

    2.邊緣效應

    使用96孔板的ELISA測定中，常發現有“邊緣效應"，即外周孔顯色較中心孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體，在實驗室的常規ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應"，并且可提高測定的重復性。

     人p物質（SP）ELISA試劑盒包含以下各組分：

    （1）結合物及標本的稀釋液；

    （2）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

    （3）酶標記的抗原或抗體（結合物）；

    （4）酶的底物；

    （5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），ELISA試劑盒參考標準品和控制血清（定量測定中）；

    （6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

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