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    上海遠慕生物為您提供人紅細胞生成素受體（EPOR）ELISA試劑盒，我司是國內elisa試劑盒優質供應商，代理銷售不同elisa試劑盒品牌的進口/國產elisa試劑盒，專業供應科研實驗所需的培養基，抗體，動物血清血漿，標準品對照品，化學試劑，酶聯免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，微生物，蛋白質，ELISA種屬涵蓋廣，憑借多年行業經驗，擁有完善的售后服務，高質量的產品。咨詢！

    中文名稱：人紅細胞生成素受體（EPOR）ELISA試劑盒

    別名：人紅細胞生成素受體（EPOR）ELISA Kit

    供貨商：上海遠慕

    產品規格：96T/48T

    保存條件：2-8℃低溫保存

    保質期：6個月，所有試劑盒均提供批次。

    檢測方法：酶聯免疫法/酶免法（ELISA）

    待檢樣本：體液，血清，血漿，細胞培養上清液，尿液，組織勻漿，心房水標本等等。

    特點：高效、靈敏、特異的抗體；穩定的重復性和可靠性；吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；節省實驗經費。

    用途：只適用于科研

    處理及要求：

    1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

    2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

    4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

    5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

    6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

    7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

    操作方法：

    一、雙抗體夾心法

    1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

    2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

    3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

    4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

    5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

    6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

    二、間接法

    1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃；

    2.次日洗滌3次；

    3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時，洗滌；

    4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；

    5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

    6.zui后一遍用DDW洗滌。

    其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

    人紅細胞生成素受體（EPOR）ELISA檢測試劑盒使用注意事項：

    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

    2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

    3.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

    4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

    5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

    6.底物請避光保存。

    7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

    8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

    9.本試劑不同批號組分不得混用。

    10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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