上海遠慕生物科技有限公司

ELISA試劑盒特殊的包被方式

其后 通過抗原抗體反應使抗原固相化。此間接結合在固相上的抗原遠離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經固相抗體的親和層析作用，人elisa試劑盒包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重復性亦佳。間接包被 的另一優點是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質抗原可采用。例如，在檢測抗DNA抗體時，需用 DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法： 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
↓
人ELISA試劑盒加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被的反應孔
中,置37℃孵育1小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）
↓
于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，
37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
↓
其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

將 抗原或抗體固定在過程稱為包被。換言之，包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子 結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、人ELISA試劑盒濃度等的影響。載體對不同 蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，因此更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附 力，其聯結多發生在Fc段上，抗體結合點暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。