原代細(xì)胞：從體內(nèi)直接分離的細(xì)胞。功能、代謝、形態(tài)類似體內(nèi)細(xì)胞的特點，因此原代細(xì)胞適用于分析單個細(xì)胞形態(tài)、代謝、功能。原代細(xì)胞的缺點是：細(xì)胞均一性差，因為從特定組織取下來的原代細(xì)胞可能處于不同的發(fā)育時期。增殖能力差、培養(yǎng)時間受限、轉(zhuǎn)染效率低。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
?、?組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
細(xì)胞株：細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)首ci傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line)， 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line)， 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 所以細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講，可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。對于人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
原代細(xì)胞由于轉(zhuǎn)染效率低這個問題，應(yīng)用受到了限制。自從腺病毒誕生后，因為其chao強的感染能力，克服了原代細(xì)胞難感染的問題，使得原代細(xì)胞的使用變得更加簡單。由于細(xì)胞實驗后，很多時候需要做到動物體內(nèi)，由于原代細(xì)胞有體內(nèi)細(xì)胞的特點，為了細(xì)胞實驗和動物體內(nèi)實驗的結(jié)果更加趨向一致性，因此用原代細(xì)胞來進行細(xì)胞實驗更值得考慮。
 |
 |
 |
